مطالعه ساختار و عملکرد کاتالاز در حضور دوپامین

مطالعه ساختار و عملکرد آنزیم کاتالاز کبد گاو در حضور و عدم حضور دوپامین، در دمای 37 درجه سانتی گراد، 0/7ph و محیط بافر فسفات 50 میلی¬مولار با استفاده از اسپکتروپلاریمتری دورنگ نمایی دورانی و اسپکتروسکوپی uv-vis صورت گرفت. طیف ماوراءبنفش- مرئی پروتئین در حضور و عدم حضور دوپامین نشان می¬دهد که یک پیک جذبی جدید در حدود 566 نانومتر همراه با کاهش در شدت جذب 405 نانومتر صورت می¬گیرد. برهم¬کنش کاتالاز و دوپامین به زمان آنکوبه، غلظت دوپامین و ph محلول بافر وابسته است. ما مشاهده کردیم که برهم¬کنش کاتالاز و دوپامین موجب کاهش در فعالیت آنزیم و تغییر در ساختارهای دوم و سوم پروتئین می¬شود. سنجش میزان توده¬ای شدن گرمایی آنزیم در حضور و عدم حضور دوپامین نشان می¬دهد که برهم¬کنش دوپامین و کاتالاز بطور موثری مهارکننده توده¬ای شدن گرمایی کاتالاز می¬باشد. البته باید متذکر شد که این اثر مهار بر توده¬ای شدن پروتئین اگر چه بر اثر دوپامین بوجود می¬آید ولیکن در محدوده 100-25 میکرومولار دوپامین، مقدار این مهار وابسته به غلظت دوپامین نیست. تعیین پارامترهای ترمودینامیکی برهم¬کنش دوپامین با کاتالاز نیز نشان داد که تمایل برهم¬کنش بین دوپامین و کاتالاز از لحاظ انرژیتیک مطلوب می¬باشد. بررسی سینیتیک آنزیم کاتالاز در حضور و عدم حضور دوپامین نشان داد که در حضور دوپامین vmax کاهش می¬یابد اما در مقدار km تغییری ایجاد نمی¬شود.